El análisis de micotoxinas plantea importantes desafíos debido tanto a las bajas concentraciones que deben determinarse como a la complejidad de las matrices alimentarias. Cereales, frutos secos, café, especias, alimentos y alimentos para animales pueden contener grasas, pigmentos, proteínas, carbohidratos y otros componentes capaces de interferir durante la determinación instrumental. Por ello, utilizar columnas para análisis de micotoxinas adecuadas puede marcar una diferencia importante en la calidad del resultado.
La preparación de la muestra se convierte así en una etapa fundamental para conseguir sensibilidad, selectividad, reproducibilidad y confiabilidad. Un sistema instrumental de altas prestaciones puede proporcionar una elevada capacidad analítica, pero el extracto que llega al equipo debe estar correctamente preparado para reducir interferencias y efectos de matriz que puedan comprometer la determinación.
Para responder a estas necesidades, LCTech, fabricante alemán especializado en preparación de muestras, dispone de una amplia gama de soluciones específicamente desarrolladas para el análisis de micotoxinas mediante HPLC, HPLC-FLD y LC-MS/MS. Su portafolio incluye desde columnas de inmunoafinidad altamente selectivas hasta soluciones SPE orientadas a métodos multianalito.
Por qué la preparación de muestras es crítica en el análisis de micotoxinas
Antes de realizar la determinación instrumental, las micotoxinas deben extraerse de matrices que pueden presentar una composición considerablemente compleja. Esta complejidad constituye uno de los principales retos del procedimiento analítico.
El extracto obtenido de una muestra de alimento no contiene únicamente el analito de interés. Junto a las micotoxinas pueden encontrarse grasas, proteínas, carbohidratos, pigmentos y numerosas sustancias propias de la matriz, algunas de las cuales pueden interferir posteriormente con el análisis.
Por esta razón, la limpieza o clean-up del extracto tiene como objetivo reducir la presencia de estos componentes antes de que la muestra llegue al sistema cromatográfico.
Qué aporta el clean-up de la muestra
Una etapa de limpieza correctamente seleccionada permite obtener un extracto más adecuado para la posterior determinación instrumental. Dependiendo del analito, la matriz y la metodología empleada, esto puede contribuir a:
- reducir interferencias y efectos de matriz;
- mejorar la selectividad del método;
- obtener extractos más limpios;
- proteger las columnas y los sistemas cromatográficos;
- mejorar la reproducibilidad entre muestras;
- facilitar la determinación de micotoxinas a bajas concentraciones.
En consecuencia, cuando se trabaja en análisis de trazas, la preparación de la muestra no debe considerarse simplemente un paso previo al análisis instrumental, sino una parte fundamental del propio método analítico.
Columnas para análisis de micotoxinas LCTech
LCTech ha desarrollado diferentes columnas para análisis de micotoxinas con el objetivo de responder a las necesidades específicas de cada determinación.
No todas las micotoxinas presentan las mismas características ni todos los métodos persiguen el mismo objetivo. Un laboratorio puede necesitar determinar exclusivamente aflatoxinas, analizar ocratoxina A, cuantificar DON o realizar una metodología que permita estudiar múltiples micotoxinas simultáneamente.
Por ello, la elección de la columna debe realizarse teniendo en cuenta el analito de interés, la matriz analizada y la técnica instrumental utilizada.
Columnas de inmunoafinidad para micotoxinas
Uno de los pilares del portafolio de LCTech son las columnas de inmunoafinidad o IAC.
Estas columnas utilizan anticuerpos específicos capaces de retener selectivamente la micotoxina de interés. Durante el procedimiento, otros componentes presentes en el extracto pueden eliminarse, permitiendo posteriormente recuperar el analito retenido para continuar con su determinación.
La elevada selectividad de este principio resulta especialmente útil en matrices complejas, donde la presencia de numerosos componentes puede dificultar el análisis directo del extracto.
Por tanto, las columnas IAC permiten realizar una limpieza dirigida específicamente hacia determinadas micotoxinas antes de técnicas como HPLC, HPLC-FLD o LC-MS/MS.
AflaCLEAN™ para el análisis de aflatoxinas
Dentro de las soluciones de LCTech se encuentra AflaCLEAN™, una columna de inmunoafinidad destinada al análisis de las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2.
Las aflatoxinas pueden requerir procedimientos analíticos altamente sensibles y selectivos, especialmente cuando se encuentran a bajas concentraciones y deben determinarse en matrices alimentarias complejas.
En este contexto, AflaCLEAN™ permite incorporar una etapa de clean-up selectivo antes de la determinación instrumental.
Limpieza selectiva antes del análisis instrumental
La utilización de anticuerpos específicos permite retener las aflatoxinas de interés mientras se eliminan numerosos componentes interferentes presentes en el extracto.
De esta manera, la muestra que posteriormente se introduce en el sistema analítico presenta un nivel de limpieza mayor que el extracto inicial.
Esta característica hace que AflaCLEAN™ forme parte de las soluciones de LCTech destinadas a laboratorios que necesitan realizar determinaciones selectivas de aflatoxinas B1, B2, G1 y G2.
AflaCLEAN™ M1 para aflatoxina M1 en leche y productos lácteos
La gama también incluye AflaCLEAN™ M1, desarrollada específicamente para el análisis de aflatoxina M1 en leche y productos lácteos.
En este caso, la aplicación presenta unas necesidades particulares debido tanto al analito objetivo como a las características de la matriz. Por ello, disponer de una columna específica permite orientar el procedimiento de preparación de muestras hacia esta determinación concreta.
Una solución específica para matrices lácteas
AflaCLEAN™ M1 permite realizar la etapa de limpieza necesaria antes del análisis instrumental de aflatoxina M1.
Esta especificidad refleja uno de los principios fundamentales de la preparación de muestras: la solución debe seleccionarse en función de la combinación entre analito y matriz, en lugar de utilizar indiscriminadamente un único procedimiento para todas las aplicaciones.
OtaCLEAN™ para la determinación de ocratoxina A
Para laboratorios que necesitan analizar ocratoxina A, LCTech dispone de OtaCLEAN™.
Al igual que otras columnas de inmunoafinidad, su función es proporcionar una etapa de limpieza selectiva que permita separar el analito de interés de una parte importante de los componentes interferentes presentes en la muestra.
Esta capacidad resulta particularmente relevante en matrices complejas como cereales, café, especias y otros alimentos donde el extracto puede contener numerosas sustancias adicionales.
Mayor selectividad para el análisis de ocratoxina A
La utilización de una solución desarrollada específicamente para ocratoxina A permite adaptar el clean-up a las características concretas de esta determinación.
Así, OtaCLEAN™ se integra dentro del procedimiento de preparación de muestras para análisis de micotoxinas, facilitando la obtención de extractos más limpios antes de la etapa cromatográfica.
Afla-OtaCLEAN™ para aflatoxinas y ocratoxina A
No todos los procedimientos necesitan analizar una única familia de micotoxinas. En algunos casos, interesa determinar diferentes contaminantes dentro del mismo flujo analítico.
Para estas aplicaciones, LCTech dispone de Afla-OtaCLEAN™, una solución que permite realizar conjuntamente el clean-up de aflatoxinas y ocratoxina A.
Clean-up conjunto de diferentes micotoxinas
La posibilidad de abordar ambas determinaciones dentro de una misma estrategia de preparación puede resultar especialmente interesante para laboratorios que necesitan controlar diferentes micotoxinas en una misma matriz.
De este modo, LCTech amplía su gama más allá de las columnas destinadas a un único grupo de analitos y proporciona alternativas para procedimientos que requieren una mayor capacidad de análisis.
DONeX™ para el análisis de deoxinivalenol
Para el análisis de deoxinivalenol (DON) y compuestos relacionados, LCTech ofrece DONeX™, una solución basada en extracción en fase sólida o SPE.
A diferencia de las columnas de inmunoafinidad mencionadas anteriormente, esta alternativa utiliza un enfoque SPE para realizar el clean-up de la muestra.
Esto demuestra que la preparación de muestras para micotoxinas no depende de una única tecnología. La técnica de limpieza debe seleccionarse de acuerdo con las características de los analitos y del método analítico utilizado.
Preparación de muestras para DON
DONeX™ permite incorporar una etapa de limpieza orientada específicamente a la determinación de DON y compuestos relacionados.
Por tanto, amplía las posibilidades del laboratorio cuando las necesidades analíticas van más allá de aflatoxinas u ocratoxina A y se requiere trabajar con otras micotoxinas de interés.
CrossTOX® para análisis multi-micotoxina mediante LC-MS/MS
Los métodos actuales pueden requerir la determinación simultánea de múltiples micotoxinas en una única muestra. En estos casos, una limpieza excesivamente específica hacia un único compuesto podría no responder a las necesidades del procedimiento.
Para estas aplicaciones, LCTech dispone de CrossTOX®, una solución SPE orientada a métodos multi-micotoxina mediante LC-MS/MS.
Clean-up para métodos multianalito
CrossTOX® permite abordar la preparación de muestras desde una perspectiva diferente a la de una columna destinada exclusivamente a una micotoxina concreta.
Su orientación hacia métodos multi-micotoxina hace que resulte adecuada cuando el objetivo analítico consiste en estudiar diferentes compuestos mediante LC-MS/MS.
Así, el laboratorio puede seleccionar entre soluciones altamente específicas para determinados analitos o alternativas orientadas al análisis multianalito, dependiendo de las necesidades del método.
Columnas SMART: clean-up de micotoxinas en formato compacto
Además de sus configuraciones convencionales, LCTech ofrece parte de sus columnas de inmunoafinidad en formato SMART.
Este formato ha sido desarrollado para trabajar con menores volúmenes de reactivos y solventes, además de reducir los tiempos asociados a la preparación de las muestras.
Por tanto, el formato SMART busca aumentar la eficiencia del procedimiento sin renunciar a la selectividad necesaria para el análisis de micotoxinas.
Menor consumo de reactivos y solventes
Reducir el volumen de reactivos y solventes utilizado durante el clean-up puede contribuir a simplificar la preparación de muestras y disminuir el consumo de materiales por análisis.
Cuando un laboratorio procesa un número elevado de muestras, estas mejoras pueden adquirir una importancia considerable dentro del flujo de trabajo diario.
Reducción de los tiempos de preparación
Por otro lado, el formato SMART también está orientado a reducir los tiempos de preparación, facilitando procedimientos de clean-up más eficientes.
Esta combinación de menor consumo y reducción de tiempos permite optimizar el proceso manteniendo la selectividad requerida para la determinación posterior.
Cómo elegir una columna para análisis de micotoxinas
La existencia de diferentes soluciones responde a una realidad sencilla: no existe una única columna adecuada para todos los análisis de micotoxinas.
Para seleccionar correctamente la alternativa, deben considerarse conjuntamente tres factores fundamentales: el analito que se pretende determinar, la matriz en la que se encuentra y la metodología analítica que utilizará el laboratorio.
| Solución LCTech | Aplicación principal | Tipo de preparación |
| AflaCLEAN™ | Aflatoxinas B1, B2, G1 y G2 | Inmunoafinidad |
| AflaCLEAN™ M1 | Aflatoxina M1 en leche y productos lácteos | Inmunoafinidad |
| OtaCLEAN™ | Ocratoxina A | Inmunoafinidad |
| Afla-OtaCLEAN™ | Aflatoxinas y ocratoxina A | Clean-up conjunto |
| DONeX™ | Deoxinivalenol (DON) y compuestos relacionados | SPE |
| CrossTOX® | Múltiples micotoxinas mediante LC-MS/MS | SPE multianalito |
Esta variedad permite adaptar la preparación a objetivos analíticos diferentes, desde una determinación altamente específica hasta procedimientos en los que se estudian múltiples micotoxinas simultáneamente.
El analito de interés
El primer criterio es determinar qué micotoxina o grupo de micotoxinas necesita analizar el laboratorio.
Si el objetivo son aflatoxinas B1, B2, G1 y G2, la solución será diferente de la utilizada para aflatoxina M1, ocratoxina A o DON. Del mismo modo, un método multi-micotoxina requiere un planteamiento distinto.
La matriz de la muestra
El segundo factor es la matriz. Cereales, frutos secos, café, especias, leche, otros alimentos y alimentos para animales presentan composiciones diferentes y, por tanto, pueden generar distintos tipos de interferencias.
La preparación debe ser capaz de reducir los componentes problemáticos de la matriz sin comprometer la recuperación de los analitos de interés.
La metodología instrumental
Finalmente, debe considerarse la técnica utilizada para la determinación. LCTech dispone de soluciones destinadas a la preparación de muestras para metodologías basadas en HPLC, HPLC-FLD y LC-MS/MS.
Por ello, la elección de la columna debe formar parte del desarrollo global del método y no realizarse de forma independiente al sistema instrumental utilizado.
Beneficios de utilizar columnas específicas para micotoxinas
Una columna de clean-up específicamente seleccionada puede influir en diferentes etapas del procedimiento analítico. El beneficio no se limita únicamente a conseguir un extracto visualmente más limpio.
En primer lugar, la eliminación de componentes interferentes puede contribuir a reducir los efectos de matriz y mejorar la selectividad. Esto adquiere especial importancia cuando las micotoxinas deben determinarse a concentraciones reducidas.
Además, un extracto más limpio disminuye la cantidad de componentes de la matriz que alcanzan las columnas y los sistemas cromatográficos, ayudando a proteger el sistema analítico.
Por otro lado, controlar mejor la preparación de las diferentes muestras puede favorecer la reproducibilidad entre análisis, un aspecto esencial cuando se procesan series de muestras dentro de procedimientos rutinarios.
En conjunto, una preparación de muestras correctamente planteada contribuye a que el rendimiento de la técnica instrumental pueda aprovecharse de manera más efectiva.
Columnas para análisis de micotoxinas LCTech en Chile con SAGU
Ya sea que un laboratorio necesite analizar aflatoxinas, aflatoxina M1, ocratoxina A, DON o múltiples micotoxinas simultáneamente, LCTech dispone de soluciones específicas para diferentes matrices y técnicas instrumentales.
Su portafolio incluye columnas de inmunoafinidad como AflaCLEAN™, AflaCLEAN™ M1 y OtaCLEAN™, soluciones para clean-up conjunto como Afla-OtaCLEAN™, además de alternativas SPE como DONeX™ y CrossTOX®. A ello se suma la disponibilidad del formato SMART para determinadas columnas, orientado a disminuir el consumo de reactivos y solventes y reducir los tiempos de preparación.
En SAGU ponemos a disposición de los laboratorios en Chile las columnas LCTech para preparación de muestras y análisis de micotoxinas, ofreciendo apoyo en la selección de la alternativa más adecuada según el analito, la matriz y la metodología analítica utilizada.
Cuando se analizan micotoxinas a nivel de trazas, un buen resultado comienza con una buena limpieza de la muestra. Seleccionar correctamente la etapa de clean-up permite controlar una de las partes fundamentales del método antes de que la muestra llegue al sistema instrumental.
Si necesita seleccionar una solución LCTech para su metodología de análisis de micotoxinas, puede contactar con el equipo de SAGU para evaluar los requerimientos de su laboratorio.
